铁死亡（Ferroptosis）是一种依赖于铁的新型程序性细胞死亡方式，其核心特征为脂质过氧化物的积累和抗氧化防御系统的失常。这种细胞死亡机制与凋亡、坏死或焦亡不同，显示出在肿瘤治疗、神经退行性疾病和代谢性疾病等领域的巨大潜力。今天，我们将详细介绍铁死亡相关的细胞模型的制备与检测方案，以为疾病机制的研究和药物开发提供实验工具。

铁死亡的核心机制

铁死亡的关键在于谷胱甘肽（GSH）的耗竭，主要调控通路包括谷胱甘肽/GPX4通路、FSP1-CoQ10通路、GCH1-BH4通路以及线粒体DHODH-CoQ通路。当谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的活性下降，脂质过氧化物无法被清除，从而导致其在细胞内的蓄积。同时，二价铁离子（Fe2+）通过芬顿反应催化脂质过氧化物生成活性氧（ROS），最终诱发铁死亡。Fe²⁺的存在还促使脂质过氧化链式反应的开始和传播，导致细胞膜上大量积累脂质过氧化物，进而破坏膜结构，引发铁死亡。

疾病模型的建立

为了模拟人类疾病中铁死亡的过程，可以构建多种细胞模型（例如原代细胞和细胞系）和动物模型（包括小鼠和大鼠等）。适用的技术手段包括CRISPR/Cas9基因编辑、shRNA/siRNA的操作、基因过表达及转基因/条件性敲除小鼠模型等。

关键分子的检测

关键分子检测应包括GSH/GSSG比值、GPX4活性和蛋白水平、SLC7A11/xCT蛋白水平及功能、FSP1蛋白水平以及ACSL4蛋白水平等。

铁代谢与脂质过氧化的检测

铁离子探针、铁蛋白水平、转铁蛋白饱和度及铁染色等方法可用于铁代谢检测。同时，使用ROS聚集流式细胞仪、荧光显微镜，结合生化法、ELISA或WB法检测LPO、MDA和4-HNE，进行脂质过氧化的代谢检测。

细胞死亡鉴定的方法

通过形态学观察、caspase活性检测、LDH释放分析和线粒体功能检测等方法可将铁死亡与凋亡、坏死、焦亡等其他类型的细胞死亡进行区分。

实验工具推荐

我们推荐一些用于铁死亡研究的关键实验工具和试剂，包括：

• 谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）活性检测试剂盒
• 总谷胱甘肽（T-GSH）及氧化谷胱甘肽（GSSG）检测试剂盒
• 脂质过氧化物（LPO）测定试剂盒
• 反应氧物种（ROS）测定试剂盒
• 铁代谢相关检测试剂盒

这些产品均可通过尊龙凯时人生就博获得，有利于推进铁死亡研究的进展。

以上就是关于铁死亡机制、模型构建及检测方案的系统介绍。我们诚挚欢迎您与我们的技术团队联系，讨论实验设计、技术细节或具体的Protocol实施，如需了解更多相关研究内容，也欢迎随时咨询！