尊龙凯时人生就博为您带来了电泳缓冲液的详细配方,适合生物医疗研究中的应用。本文将介绍两种常用电泳缓冲液的成分及其配制方法。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
配制1L 50×Tris-乙酸缓冲液的各成分用量如下:
- 2 mol/L Tris碱:242 g
- 1 mol/L 乙酸:571 ml冰乙酸(174 mol/L)
- 100 mmol/L EDTA:200 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 加水至1 L
2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
配制1L 5×TBE缓冲液的各成分用量如下:
- 445 mmol/L Tris碱:54 g
- 445 mmol/L 硼酸盐:275 g
- 10 mmol/L EDTA:20 ml 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 加水至1 L
3. 染料制备
在电泳过程中,染料的使用至关重要。以下是常用染料的制备方法:
3.1 1% 溴酚蓝
将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶于100 ml水中,搅拌或涡旋混合至完全溶解。
3.2 1% 二甲/苯青FF
将1 g二甲/苯青FF溶解于足量水中,定容至100 ml。
3.3 10 mg/ml 溴化乙锭
小心称取1 g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加入100 ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
4. 凝胶上样液配置
凝胶上样液的选择根据实验需求而有所不同,以下是几种常用的配置:
4.1 6×碱性凝胶上样液
配制10 ml溶液的成分如下:
- 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L
- 18% 聚蔗糖(400型)
- 0.15% 溴甲/酚绿
- 0.25% 二甲/苯青FF
- 水:300 µl
- 10 N氢氧化钠:120 µl
- 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):18 g,补足到10 ml
4.2 6×聚蔗糖凝胶上样液
配制10 ml溶液的成分如下:
- 0.15% 溴酚蓝
- 0.15% 二甲/苯青FF
- 5 mmol/L EDTA
- 15% 聚蔗糖(400型):水:15 ml
- 1% 溴酚蓝:15 ml
- 1% 二甲/苯青FF:100 µl
- 0.5 mol/L EDTA(pH 8.0):15 g,补足到10 ml
通过以上步骤,您可以轻松配置适合生物医疗研究的电泳缓冲液及染料,助力您的科研工作。使用尊龙凯时人生就博各类产品,提升您的实验效率和成功率!