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人可溶性E选择素(sE-selectin)检测套件 - 尊龙凯时人生就博品牌说明书

发布时间:2025-03-02   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒的使用说明如下:

人可溶性E选择素(sE-selectin)检测套件 - 尊龙凯时人生就博品牌说明书

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。随后,使用底物TMB进行显色过程,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,最终在酸性条件下转为黄色。颜色的深浅与样本中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过在450nm波长下的酶标仪测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清: 使用不含热原和内毒素的试管,操作时需避免任何细胞刺激,收集血液后,以3000转离心10分钟迅速小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液: 以3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆: 将组织加入适量生理盐水进行捣碎,之后以3000转离心10分钟取上清。

5. 保存: 若样本收集后未及时检测,请按照一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时在室温下确保样品均匀充分解冻。

自备物品与操作注意事项

请注意试剂盒中标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂准备: 20×洗涤缓冲液的稀释方法为:将蒸馏水按1:20比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法与结果判断

通过在Excel中绘制标准曲线,以标准品的浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,构建标准品的线性回归曲线,依据曲线方程计算各样本浓度值。

免责声明: 本试剂盒的性能依赖于实验操作的规范性,请在使用时谨慎遵循说明书。

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